广东畜牧兽医科技

王亦秋, 姜自琴, 王宇哲, 徐振强, 胡晓湘

2023, 48(5): 1-6. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.01

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基因组选择技术是利用覆盖全基因组的遗传标记进行个体基因组育种值的估计。单核苷酸多态性标记（Single nucleotide polymorphisms，SNP）被广泛应用于各遗传学领域。近年来，各种全基因组 SNP 标记开发方法的发展使得研究者们能够以低成本获得大量遗传标记，推动了基因组选择技术的发展。该文综述了三种主要的全基因组 SNP 分型策略，并总结了基因组选择技术在不同畜禽动物育种中的应用情况，同时展望了其未来发展前景，以期为基因组选择过程中选择合适的 SNP 分型策略提供借鉴和参考。

蛋氨酸在鸭中的生物学功能及应用研究进展

张亚男, 庄智威, 金永燕, 陈伟, 王爽, 夏伟光, 金成龙, 朱晓萍, 郑春田

2023, 48(5): 7-14. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.02

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蛋氨酸是饲喂玉米?豆粕型饲粮家禽的第一限制性氨基酸，对于维持家禽正常的生长和生产具有重要作用，但蛋氨酸在家禽研究和生产中的应用主要集中于鸡，在鸭的报道较少。常用的蛋氨酸源主要有DL?蛋氨酸、蛋氨酸羟基类似物、L?蛋氨酸等。不同蛋氨酸来源在体内的吸收转化不同，发挥的作用效果也不同。D?蛋氨酸和蛋氨酸羟基类似物需经消化道前端、十二指肠或回肠吸收，在限速酶、转氨酶等作用下生成L?蛋氨酸，然后再在肝脏等组织中参与代谢，促进蛋白质的合成，为蛋氨酸循环提供甲基供体，发挥抗氧化功能等。因此，该文总结了蛋氨酸的代谢、在鸭中的生物学功能及其在生产中的应用研究，包括蛋氨酸在鸭中的表观消化率、蛋氨酸及其不同来源在肉鸭和蛋鸭中的最适需要量及相对生物学效价研究，以期为蛋氨酸及其不同来源在鸭生产中的合理应用提供科学依据。

肠道类器官在猪基础研究的应用现状及前景

谢泽恩, 张永亮

2023, 48(5): 15-22. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.03

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类器官是指由细胞组成的类似器官的结构。肠道类器官是一个由肠道干细胞经过体外培养得到的多种细胞组成的三维结构。近年来，肠道类器官在医学、药物筛选和动物科学的研究领域受到了关注。由于能较好还原体内生理状况，肠道类器官是替代细胞作为体外研究的有力工具。在猪基础研究上能模拟病毒感染、肠道生理状况等，现已用于营养吸收和病毒疾病等的研究。近年来，畜牧兽医领域的一些团队逐渐采用肠道类器官进行研究，近年来相关文章数也在逐年上升，可见其在猪基础研究上逐渐展露出其优势，其应用前景可观，但进一步扩增其应用还有一些悬而未决的问题，因此该文综述了肠道类器官在动物科学特别是猪研究上的应用，并提出其在畜牧兽医领域一些发展建议。

人兽共患猪δ冠状病毒研究综述：病原学，流行病学及防控措施

郭怡凡, 颜权辉, 邢家宝, 李子杰, 曾伟俊, 范双旗

2023, 48(5): 23-26. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.04

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近年来，人兽共患的冠状病毒（Coronavirus，CoV）感染不断新发或再发，给公共卫生安全和健康养殖带来巨大威胁。最早报告于香港的猪δ冠状病毒（Porcine deltacoronavirus，PD? CoV）感染就是其中之一，其病原学特征于2014年在美国首次确定，随后北美和亚洲各国也进行了广泛的报道。PDCoV 表现出高度的遗传多样性，在谱系间和谱系内存在频繁的重组现象。该病毒可同时感染鸟类和包括人类在内的多种哺乳动物，并且感染人的不同谱系毒株还具有趋同进化的特性，这也为维护公共卫生安全带来了严峻挑战。本文通过综述人兽共患猪δ 冠状病毒的研究现状，从病原学、流行病学等方面分析其出现的过程和原因，以期进一步了解猪δ冠状病毒的起源及跨物种传播途径并提出防控建议。

鸡传染性法氏囊病疫苗的研究进展

张旭知，孙彩宜，徐少珠，张国丽，齐冬梅

2023, 48(5): 27-32. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.05

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鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease，IBD）是由鸡传染性法氏囊病病毒（In? fectious Bursal Disease Virus，IBDV）引起的、主要侵害幼龄鸡的一种急性、高度接触性传染病，其主要特征是导致法氏囊的严重损伤和免疫抑制。自20世纪80年代以来，IBDV在很多国家和地区均发现以毒力增强为主要特征的抗原变异，出现了变异毒株（vIBDV）和超强毒株（vvIB? DV）。IBD在全球范围内给养禽业造成了重大的经济损失。目前主要采取疫苗接种和生物安全相结合的综合防控措施，该文对已商品化的和正在研发中的IBD减毒活疫苗、全病毒灭活疫苗、免疫复合物疫苗、重组载体活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗等进行综述，以期为更好的防控 IBD提供理论参考。

乳剂类免疫佐剂研究进展

徐少珠，张国丽，史大庆，丘成文，邝贞结，齐冬梅

2023, 48(5): 33-38. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.06

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乳剂类免疫佐剂又称为油类佐剂，是将抗原包裹在各种油相中，以实现为抗原提供贮存库，并通过将抗原靶向递呈给免疫细胞以增强机体对抗原的特异性免疫应答反应的一类免疫佐剂。自1916年首次报道乳剂类佐剂的应用至今，一百多年来乳剂类佐剂已成为疫苗研制与开发中不可缺少的重要因素，为应对人类和动物各种传染病提供更安全有效的疫苗提供了物质保障。随着现代疫苗学不断的发展，新型疫苗的研制和开发对佐剂提出了更高的要求，了解佐剂的组成成分、有效性和安全性的免疫作用机理是佐剂应用于疫苗研制和开发的前提。因此本文选择了白油佐剂、完全弗氏佐剂（Complete Freund’s Adjuvant，CFA）、不完全弗氏佐剂（Incomplete Freund’s adjuvant，IFA）、MF59?、AS（Adjuvant systems，AS）系列和Montanides 系列等目前常用和商品化的乳剂类免疫佐剂，对其佐剂组成成分、免疫作用机理和临床应用情况等进行综述，以期为乳剂类免疫佐剂的临床使用提供一定的理论参考。

中草药制剂对低鱼粉养殖大口黑鲈生长性能、血清抗氧化能力及肝脏健康的影响

胡俊茹，陈晓瑛，吴浩敏，邓敬明，袁名贵

2023, 48(5): 39-45. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.07

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该试验旨在评价中草药提取物及发酵中草药对大口黑鲈生长性能、血清抗氧化能力及肝脏健康的影响。选用初始均重为4.40 g左右的幼鱼840尾，随机分为6组，每组4个重复，每个重复35尾。在基础饲料中分别添加0、0.05%、0.1%、0.2%、0.4% 的中草药提取物以及0.4% 的发酵中草药，配置6种等氮等能的试验饲料，分别记为G0、G0.05、G0.1、G0.2、G0.4、GF0.4，试验周期为51 d。结果显示：各组间大口黑鲈末均重、增重率、特定生长率、存活率和摄食率差异不显著（P>0.05）。与 G0 组比较，G0.1 组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶的活性显著升高（P< 0.05），G0.05组血清谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活性显著升高（P<0.05），G0.1和GF0.4血清丙二醛（MDA）的含量显著降低（P<0.05）。肝脏组织切片显示，G0组胞质疏松淡染，少量淋巴细胞灶性浸润，G0.05、G0.1、G0.2组偶见小灶性淋巴细胞浸润；G0.4组可见多量肝细胞水样变性，胞质疏松淡染，少量淋巴细胞浸润；而GF0.4组未见明显异常。综上所述，低鱼粉饲料中添加中草药提取物和发酵中草药对大口黑鲈生长性能影响不显著，但添加0.05%中草药提取物以及0.4%发酵中草药能够提高低鱼粉养殖大口黑鲈的抗氧化能力和肝脏组织健康状况。

基于细胞焦亡探讨复方清肝汤对犬急性肝损伤的作用

谢子茂，苏依曼，邱文粤，黄健佳，白雨曼，谢文婷，周水莲，王荣梅

2023, 48(5): 46-52. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.08

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该文旨在探讨复方清肝汤对四氯化碳诱导的犬急性肝损伤的治疗作用及其机制。实验选用18只12－15月龄的中华田园犬，随机分为3组，每组6只，即对照组、模型组和中药治疗组；通过腹腔注射1 mL/kg体重的四氯化碳构建急性肝损伤模型，治疗组每天灌服1 mL/kg 的复方清肝汤，连续14 d。试验结束时，采血进行肝功能检测和取出肝组织样品。H&E染色观察肝组织病理学变化，qRT?PCR检测肝细胞焦亡相关基因NLRP3、ASC、GSDMD、Caspase?1、 IL?1β 和 IL?18的mRNA表达水平，Western Blot 检测肝细胞焦亡相关蛋白NLRP3、GSDMD、Cas? pase?1、IL?1β 和 IL?18的表达水平，免疫组织化学法检测细胞焦亡执行蛋白GSDMD的定位及其表达。实验结果表明，模型组 AST、ALT 和 γ?GT 的活性显著升高（P<0.05）；肝细胞排列紊乱，并出现肝细胞坏死和炎性细胞浸润；细胞焦亡相关基因NLRP3、ASC、IL?1β和IL?18表达显著升高（P<0.05），细胞焦亡相关蛋白NLRP3、GSDMD、Caspase?1、IL?1β和IL?18的表达上调；用复方清肝汤治疗后，AST、ALT和γ?GT的活性显著降低（P<0.05），肝组织病理损伤明显改善；细胞焦亡相关基因NLRP3、ASC、IL?18的mRNA表达水平显著下降（P<0.05），细胞焦亡相关蛋白 NLRP3、GSDMD、Caspase?1、IL?1β和IL?18表达出现降低。复方清肝汤可通过抑制肝细胞焦亡减轻四氯化碳诱导的犬急性肝损伤。

H9N2禽流感病毒PB2蛋白627位点突变对小鼠肺脏 RIP3、Slit2和Robo4表达和分布的影响

许丹，邓志乐，刘瑞东，胡岂铭，宁章勇，范小龙

2023, 48(5): 53-58. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.09

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PB2蛋白627位点被证实是决定甲型流感病毒宿主范围和致病性的关键因子，为深入探究H9N2禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）及其PB2蛋白627位点突变株对BALB/C小鼠肺脏RIP3、Slit2和Robo4基因表达和组织分布的影响，该研究使用H9N2 AIV（VK627）和该毒株PB2蛋白627位点突变株（rVK627E）感染BALB/C 小鼠，分别在攻毒后第1、3、5、6 d采集肺组织，通过qRT?PCR和免疫组织化学技术对RIP3、Slit2和Robo4基因在小鼠肺组织中的特异性表达和分布进行研究。结果显示，攻毒组小鼠肺脏RIP3的表达量与对照组相比显著上升，同时 VK627组RIP3的表达量显著高于rVK627E组；Slit2和Robo4的表达量在攻毒后第1 d明显低于对照组，之后rVK627E组的表达量与对照组和VK627E组相比显著上升。免疫组织化学检测结果显示， RIP3蛋白主要分布在小鼠肺泡壁上皮细胞以及肺动脉血管内皮细胞，呈弱阳性表达，而攻毒组RIP3蛋白在气管粘膜下层细胞也有中至强阳性表达；Slit2蛋白在对照组和rVK627E组小鼠的肺泡上皮细胞以及气管粘膜上皮细胞中呈现中强阳性表达，而在VK627组中呈现弱阳性表达。 Robo4蛋白的分布和表达情况与Slit2蛋白相似。综上所述，H9N2 AIVs感染小鼠后，会显著影响RIP3和Slit2/Robo4的表达和分布，且其表达和分布与H9N2 AIVs对小鼠的致病性密切相关； PB2蛋白627位点的突变在H9N2 AIVs影响RIP3、Slit2和Robo4表达和分布中起着重要作用。该研究结果将为进一步探究H9N2 AIVs及其点突变毒株介导宿主病理发生的分子机制和抗炎策略的选择提供基础数据。

犬细小病毒阳性血清的制备、鉴定和初步应用

陈延飞，陈建，薛青红，李岭，孙淼

2023, 48(5): 59-63. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.10

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犬细小病毒（Canine parvovirus，CPV）阳性血清在CPV疫苗制品的效力检验、外源病毒检验和鉴别检验中不可或缺，对CPV相关生物制品的质量控制至关重要，为了制备中和抗体效价高、特异性好的CPV阳性血清，试验用CPV DD株免疫健康易感比格犬2只，经4次免疫后采血分离血清，采用微量细胞中和试验法、免疫荧光法和《中国兽药典》三部附录中无菌检验、支原体检验和外源病毒检验法对血清进行鉴定，将该血清应用在犬类疫苗的外源病毒检验和鉴别检验中，建立了CPV间接免疫荧光检测法（IFA）并应用于疫苗的效力检验（病毒含量测定）中。结果表明制备的CPV阳性血清中和抗体效价高达1∶32768，中和指数＞106.2 ，对犬瘟热病毒、犬副流感病毒和犬腺病毒的中和抗体效价均＜1∶4，狂犬病病毒中和抗体效价＜0.03 IU/ mL。用制备的阳性血清对3种CPV相关活疫苗进行外源病毒检验可完全中和10头份的疫苗毒；对2种CPV相关活疫苗进行鉴别检验，结果符合质量标准规定。利用CPV间接免疫荧光检测法对3种CPV相关活疫苗进行病毒含量测定，结果显示建立的IFA方法对3株疫苗株均有交叉免疫反应，与商品化CPV荧光单抗检测灵敏度差异不大。说明CPV阳性血清中和能力强、特异性好，可用于犬用活疫苗外源病毒检验、鉴别检验和效力检验。

一例羊驼感染支原体的病例报告

蓝间媛，李驰，巴娟，张先东，罗丽霞，刘进芳，侯月娥

2023, 48(5): 64-68. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.11

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该文对珠海台创园羊驼养殖基地出现的羊驼死亡病例进行病理剖检、组织病理学和血液学检查、分子生物学检测。血常规及生化检查提示羊驼出现炎症，尸体剖检和切片检查显示多器官充血和出血，通过PCR及序列测定确认该羊驼存在念珠菌性肺支原体感染。本文通过对该病例的确诊，积累了同类疫病防控的经验。

幼鸽疾病综合征病因分析及诊断研究进展

刘梦凡，柯骏鸿，姜含雨，杨惠湖，谢梓民，罗瑞，黄淑坚，梅堃

2023, 48(5): 69-74. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.12

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近年来，幼鸽疾病综合征（Young pigeon disease syndrome, YPDS）在全球广泛传播，给养鸽业造成巨大经济损失，目前对YPDS的研究较少，无诊断标准，且无特效药物和疫苗，对该病的防控带来巨大挑战。为更好地了解该综合征，该文从YPDS病因、流行情况、诊断方法及防控措施等方面进行系统阐述，以期为YPDS的防治提供参考。参考国内外近三十年相关文献，对可能导致YPDS的病原进行系统阐述，并对每种诊断方法及防治措施进行总结。YPDS 主要是由鸽圆环病毒（Pigeon circovirus，PiCV）、鸽疱疹病毒（Pigeon herpesvirus，PiHV）、鸽腺病毒（Pigeon adenovirus，PiADV）共同引发的一种多因素疾病，可导致7－15周龄幼鸽死亡。主要临床症状表现为精神沉郁、羽毛凌乱、厌食、呕吐、腹泻等。该综合征目前防控措施主要为加强饲养管理。该文总结了有关YPDS病因、诊断方法及防控措施，以期为生产实践提供参考。

自制猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗（XJL03株）与商品化灭活疫苗的免疫效力比较

王鹏江，曹剑，张伟，候凤，李俊辉，刘强德，袁科，孙彦军，高扬毅，张盼，周涛，贺笋

2023, 48(5): 75-79. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.13

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该研究旨在评价自制猪繁殖与呼吸综合征全病毒灭活疫苗（XJL03株）与商品化疫苗的免疫攻毒保护效果。选择4周龄仔猪20头，随机分为4组，每组5头猪，分别免疫三种全病毒灭活疫苗（即疫苗A组、疫苗B组、疫苗C组），同时设置非免疫猪为对照组。各疫苗按照对应的说明书进行免疫，3周后加强免疫1次。实验猪10周龄时，所有仔猪按照颈部肌肉注射和滴鼻途径接种PRRSV?XJL03株，3×104.5 TCID50/头。攻毒后饲养观察21 d，在规定时间采集血液样本和鼻拭子，并记录直肠温度和死亡情况。所有存活仔猪在攻毒后21天进行病理剖检。结果表明，对照组猪4/5（未接种疫苗）发病，3种灭活疫苗不能显著减轻病毒血症和临床症状，疫苗 A、疫苗B和疫苗C对仔猪保护作用分别为20%（1/5）、20%（1/5）和60%（3/5）。实验表明，全病毒灭活疫苗的保护效果有限，C疫苗能够保护60%仔猪免受高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的攻击，能够提供与商品化疫苗相当的保护效果。

不同禽白血病抗原检测试剂盒检测效果比较

刘洋，陈顺艳，王占新，廖秋生，吴志强

2023, 48(5): 80-84. DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.05.14

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禽白血病目前暂无有效的药物和疫苗进行防控，只能通过不断检测、淘汰阳性鸡以净化种鸡群，在较短时间内最大程度筛检出阳性个体非常重要。因此，选择灵敏度高、特异性强、稳定性好的抗原检测试剂盒很关键。受新冠疫情等因素的影响，某些进口的禽白血病病毒抗原检测试剂盒出现供货紧张的局面，寻找检测灵敏度和批次间稳定性好的国产试剂盒十分必要。因此，该研究通过对比评估多个国产抗原检测试剂盒（B、C、D）与某品牌进口禽白血病病毒抗原试剂盒（A）对多个不同亚群禽白血病病毒的检测灵敏度和批次间稳定性，以期筛选出检测灵敏度高、稳定性好的国产试剂盒，以保证净化工作能够持续进行。结果表明：不同试剂盒对分离细胞上清液病毒的检测灵敏度和批次间稳定性存在一定差异，A、B、C 、D这四种试剂盒的阳性率由高到低依次是B>D>C=A，其中以B试剂盒的检测灵敏度最高，试剂盒C的批次间稳定性最好、与进口试验盒A的检测结果最接近。本研究为规模化种禽场禽白血病净化过程中试剂盒的选择提供参考。

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